ЛАБОРАТОРНА РОБОТА 8
ІНДУКЦІЯ
КОРЕНЕУТВОРЕННЯ ПРИ МІКРОКЛОНАЛЬНОМУ
РОЗМНОЖЕННІ
СУНИЦІ
МЕТА: оволодіти методом індукції коренеутворення при мікроклональному
розмноженні суниці.
МАТЕРІАЛИ І УСТАТКУВАННЯ: пробірки з конгломератом бруньок суниці на
поживному середовищі, пробірки зі стерильним поживним середовищем (склад
поживного середовища див. дод. табл. 16), стерильний пінцет, стерильний
скальпель, стерильна чашка Петрі, стакан зі стерильною водою, 96 %-й етиловий спирт,
спиртівка, сірники.
Теоретична частина
При
культивуванні апікальних меристем суниці на поживному середовищі, яке містить
фітогормони класу цитокінінів
(6-БАП, кінетин та ін.), у результаті активації
пазушних меристем з однієї меристеми утворюється багато стеблових бруньок,
точки росту витягуються, розгортаються нові листки. Однак укорінення утворених
бруньок на поживному середовищі з переважанням цитокінінів не проходить. Для
вкорінення бруньок, які утворилися при мікроклональному
розмноженні суниці, необхідно їх пересадити на нове поживне середовище з
підвищеним вмістом ауксинів.
ХІД РОБОТИ
1. Для виконання
лабораторної роботи використати культуру апікальних меристем (через 3-4 тижні
після початку культивування).
2. У стерильних
умовах (у ламінарі) вийняти корок з пробірки, де
культивується апікальна меристема суниці, обпалити на спиртівці горловину
пробірки і стерильним пінцетом добути конгломерат бруньок.
3. Вивільнити
основу конгломерату від залишків агаризованого
поживного середовища, промити в стерильній воді і перенести в стерильну чашку
Петрі.
4. Роз'єднати з
допомогою стерильного скальпеля конгломерат на окремі бруньки.
5. Кожну бруньку
з допомогою стерильного пінцета перенести в окрему пробірку з поживним середовищем
для вкорінення суниці (дод., табл. 16).
6. Обпалити
шийку пробірки і корок, закрити пробірку корком.
7. Обгорнути
целофаном (парафілмом) корки пробірок і помістити в
світлову кімнату з освітленістю 10 тис. люкс, температурою 26°С і вологістю 60 %.
8. Через тиждень
розглянути і замалювати пробірки, відзначити початок коренеутворення.
Порівняти за цією ознакою різні сорти суниці; зробити відповідні висновки.
9. Через місяць
(після пересадки бруньок на середовище для вкорінення) провести наступне спостереження.
У розрізі сортів виявити рослини, які можна використати для пересадки в
нестерильні умови.
10. Пробіркові
рослини суниці, які відзначаються добрим розвитком і добре розвиненою кореневою
системою, пересадити в ящики або горшки, наповнені
сумішшю торфу і піску (співвідношення 3:1).
11. Для кращого
вкорінення і приживання пробіркових рослин суниці в ґрунті, накрити їх ковпаком
з поліетиленової плівки.
Робота захищена
балів.
Підпис викладача
Контрольні запитання: